Étude de l’impact des conditions biochimiques et mécaniques sur la matrice extracellulaire produite par les fibroblastes embryonnaires

Mots clés : fibrob­lastes, matrice extra­cel­lu­laire, bio­mé­canique, ingénierie tis­su­laire

Sous l’appellation « fibrob­laste », on retrou­ve une diver­sité de phéno­types cel­lu­laires liés à des con­traintes dif­férentes en fonc­tion des organes et de la local­i­sa­tion de ces cel­lules au sein de ces organes (Muhl et al., 2020). Cette diver­sité se retrou­ve égale­ment dans le sys­tème mus­cu­losquelet­tique (Hirsinger et al., 2024) et s’exprime notam­ment par des dif­férences struc­turelles et com­po­si­tion­nelles de la Matrice Extra­Cel­lu­laire (MEC). Ce stage s’inscrit dans un cadre plus large de car­ac­téri­sa­tion du devenir des fibrob­lastes pen­dant le développe­ment. Le pro­jet est né d’une col­lab­o­ra­tion entre l’unité d’accueil du/ de la sta­giaire (UMR CNRS 7338 BMBI, UTC) et l’unité Dev2A (IBPS, SU), spé­cial­isé dans le développe­ment du sys­tème mus­cu­losquelet­tique. Afin d’obtenir dif­férents phéno­typ­iques de fibrob­lastes isolés du sys­tème mus­cu­lo-squelet­tique d’embryons de poulet, nous pro­posons une approche basée sur l’ingénierie tis­su­laire dévelop­pée au sein du lab­o­ra­toire BMBI. Ce mod­èle implique l’application de con­traintes mécaniques d’étirement en con­di­tions dynamiques, l’utilisation de bio­matéri­aux à l’architecture con­trôlée (scaf­folds pro­duits par élec­tro­spin­ning) et la mod­u­la­tion de voies de sig­nal­i­sa­tion via des fac­teurs biochim­iques. Si des sig­naux var­iés sont appliqués lors de la cul­ture cel­lu­laire, nous atten­dons un devenir et un com­porte­ment dif­férent de ces fibrob­lastes.
Dans ce stage, on s’intéressera plus par­ti­c­ulière­ment à la car­ac­téri­sa­tion de la MEC pro­duite par ces cel­lules dans ces dif­férentes con­di­tions. Le ou la sta­giaire utilis­era entre autres des tech­niques de dosage de l’hydroxyproline et d’autres élé­ments de la MEC, de RT-qPCR, de car­ac­téri­sa­tion mécanique, de quan­tifi­ca­tion et de visu­al­i­sa­tion (immuno­flu­o­res­cence…) de ses dif­férents com­posants et pour­ra par­ticiper à la mise en place de nou­velles tech­niques au sein du lab­o­ra­toire (notam­ment AFM).
Ref­er­ences:
Muhl, L., Gen­ové, G., Lep­tidis, S. et al. Sin­gle-cell analy­sis uncov­ers fibrob­last het­ero­gene­ity and cri­te­ria for fibrob­last and mur­al cell iden­ti­fi­ca­tion and dis­crim­i­na­tion. Nat Com­mun 11, 3953 (2020).
Hirsinger E, Blavet C, Bon­nin MA, et al. Limb con­nec­tive tis­sue is orga­nized in a con­tin­u­um of promis­cu­ous fibrob­last iden­ti­ties dur­ing devel­op­ment. iScience. 2024 Jun 19;27(7):110305.